大规模的酪氨酸一组分析正在进一步说明了在特定细胞属性之前那时候隐含与神经美德性疾病无关的突变。理解和治疗这些性疾病的步骤将只能特异性和操控特定神经纤维甲型的步骤。因此,在非人类类人猿和人类之前接触这些年轻人已变得至关最重要。整合黏液无关病毒感染(rAAVs)是在神经控制系统之前顺利完成突变传达的除此以外步骤,对特定的神经纤维社会群体没有内在的并不只能性。控制系统的增强子注意到仍然通过并不只能以单细胞分辨率顺利完成酪氨酸一组和表观生物化学分析的技术的最新演进而赢取加速。但对于增强子并不只能的搜索空间仍然很大。为了集之前我们的增强子并不只能,所作并不只能除此以外分析Scn1a的基因隐含局面,Scn1a是在多种不同神经纤维社会群体之前隐含的突变,其毁损与不堪重负的中风病无关。混合用做易位易位染色质人类基因组计划(scATAC-seq)数据的单细胞测定与跨物种的氨基酸正确性相混合,所作在该突变临近提名了十个候选基因隐含氨基酸。所作确定了三种增强子,协力特异性隐含Scn1a的神经纤维社会群体的广度。其之前,一种特定的短基因隐含氨基酸都能将病毒感染隐含受限制为隐含PV的皮质之前间神经纤维(PV cIN)。
步骤:四名人脑(两名年长者/两名女性,年龄22-57岁)接受了一项外科手术,切除术了大人脑一组织(颞叶和鲸鱼体)以治疗脑膜炎中风。在所有的发病之前,每个自发性都曾接受过一次初步的手术,置于硬膜下和/或尺度灯丝顺利完成颅内受控,以确定中风复发的位置。从鲸鱼和颞叶引300μm切口,在鲸鱼切口之前,病毒感染的特异性是membrane亚区。在接种病毒感染后7~14d对培植的人切口顺利完成电生理历史记录。将培植的人切口转移到历史记录过道。对固有膜和感应属性顺利完成分析。大鼠分别保持在17.8–26.1℃和30–70%的表征湿度和湿度区域。这些参数被紧密受控和管控在啮齿类动物迁来过道。从麻省理工学院(MIT)的社会群体之前拿到了一只雌性基本上狨猴(6岁左右)。年长者(2岁)雄性黑熊(macacamulatta)来自斯坦福大学戴维斯所学院的华盛顿州第三世界类人猿分析之前心。在小鼠人脑切口探头(Zivic Instruments)上顺利完成上端切口,并在冰冷的人工人肠系膜尿液(ACSF)之前解剖V1皮质。经过处理方式后,适用适用Nova-Seq S2 100尿素试剂盒(Illumina)顺利完成人类基因组计划。
结果:在正常人或病理学演进情况下(都有Dret症)检测控制器成熟的早期动态的主要语言障碍是,在不适用转突变类动物的情况下无法转回特定的细胞属性。即使转用繁杂的遗传解决方案,年轻的PV cIN也很难成为核酸。尽量避免它们的稀土金属元素(它们代表所有抑制性cIN的40%)并且出现得比起较晚。格外广泛地说,在本分析之前确定的增强子共享了带有一般来说临床意义的神经纤维社会群体的到访唯一可。最明显的是,这些增强剂可以通过突变制剂或可调神经纤维活性而潜在地用做减轻Dret症的衰弱病症。所作事实证明角化和全身麻醉可用做直接的病毒感染传达到大人脑。通过角化麻醉,可能会有所改善局灶性中风,PFC外周或鲸鱼梦境语言障碍。相比之下,控制系统性带入病毒感染可用做只能全面打压的情况下,例如,纠正普遍性中风复发或美德语言障碍和神经退行性性疾病。所作的分析表明,对基因隐含金属元素的严密鉴别为治疗环境之前特定细胞属性的获引共享了路线图。最重要的是,事实证明我们的增强子并不只能步骤可倡导到其他突变。总体而言,我们注意到了一一组七个针对多种不同神经纤维社会群体和之前枢神经控制系统周边地区带有独特特异性的增强剂。即使转用了严密的标准(对目标年轻人的并不只能性> 90%),我们的步骤仍带有在在的成功率(> 20%)。此外,正如高度保守的氨基酸所预测的那样,所作测试的增强子集在都有人类在内的所有物种之前被证明带有同等的并不只能性和直接性。
Vormstein-Schneider, D., Lin, J.D., Pelkey, K.A. et al. Viral manipulation of functionally distinct interneurons in mice, non-human primates and humans. Nat Neurosci (2020).
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